• <acronym id="tvttp"></acronym>
    1. <optgroup id="tvttp"><li id="tvttp"></li></optgroup>
      <legend id="tvttp"></legend>
    2. <track id="tvttp"></track><span id="tvttp"></span>
    3. 全國服務咨詢熱線:

      15502157206

      article技術文章
      首頁 > 技術文章 > 三種細胞消化的方式你知道哪個

      三種細胞消化的方式你知道哪個

      發布時間:2022-05-16      點擊次數:102
        常規的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化(難消化細胞例外)即可。但少數實驗,比如病毒包裝,對細胞代數,對細胞狀態要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白。
        細胞消化三種方式
        機械消化法
        直接用液體吹打或用刮刀,施予外力讓細胞與培養底物分離;適用于貼壁性弱的細胞傳代,但相較于其它消化方法,這種外力無法量化控制,細胞分散效果差,且可能會造成大量細胞破損,使內容物釋放到培養基,進而影響細胞傳代狀態。
        離子螯合法
        細胞膜表面蛋白大多需要鈣、鎂離子來維持與胞外基質的穩定鍵結,當然也包含各種黏附蛋白(例:整合素、鈣黏著蛋白、橋粒等),螯合劑會在不破壞細胞膜表面蛋白的狀況下,抽離這些離子,使黏附蛋白失活而減少細胞-細胞間及細胞-底物間的連接作用,讓細胞較容易在施予外力時,脫離培養底物并促進細胞分散。
        0.02% EDTA是細胞傳代常用的離子螯合劑,在37℃作用效果很佳(消化較敏感的細胞可在4℃作用),適用于消化一般貼壁性細胞或細胞表面標記實驗細胞。
        但EDTA無法用血清終止其反應,所以在消化細胞后必須用緩沖鹽溶液(如:PBS)清洗離心,以免影響后續細胞貼盤效果。
        酶消化法
        用蛋白水解酶消化連接細胞及培養底物的蛋白質,適用于消化貼壁性稍強的細胞。
      愛必信(上海)生物科技有限公司
      地址:上海市浦東新區新浩路58號申江科創園18棟
      郵箱:zhouzz@absin.cn
      傳真:
      關注我們
      歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
      歡迎您關注我們的微信公眾號
      了解更多信息
      97精品久久久久久久久精品
    4. <acronym id="tvttp"></acronym>
      1. <optgroup id="tvttp"><li id="tvttp"></li></optgroup>
        <legend id="tvttp"></legend>
      2. <track id="tvttp"></track><span id="tvttp"></span>
      3. 掃一掃訪問手機站掃一掃訪問手機站
        訪問手機站